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    如何判斷eLisa和高效液相對血藥濃度的精準?

    首先需要做倍比稀釋的預實驗,判斷藥物濃度與ELISA反應后的吸光度OD值是否呈線性關系,并做出擬合曲線,對其方程公式做相關系數等常量的假設檢驗。

    elisa實驗有哪些步驟需要特別注意的呢?

    1.注意加樣及孵育時

    ①加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。

    ②孵育的時間及溫度參考試劑盒說明書。如有條件,建議加樣孵育時使用shaker震蕩儀,推薦軌道直徑3mm,轉速在500±50rpm;

    ③檢測抗體、酶標物的稀釋比例、孵育溫度、孵育時間嚴格根據說明書提示;

    ④洗板對于ELISA來說,是極其關鍵的一步,保證ELISA的特異性

    ⑤封板膜一定要一次一換,切勿二次甚至多次使用,以防交叉污染

    2.注意顯色和終止時

    ①使用前需檢查,底物在加入96孔板之前應為無色透明

    ②顯色底物需現配現用,避免污染

    ③孵育時間,說明書上為參考范圍,具體需要根據實驗條件自行摸索??蓞⒖紭饲鷿舛茸畲罂椎念伾?,變為藍色較明顯時即可

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